序 这几天天气很热，热的人心惶惶。因此一直提上日程的所谓的测序简史，也没有时间去好好的落实。中途找过一个行业内的颇有影响力的人，但是他由于种种原因，也没有能踏踏实实的去做这件事情。几经周折，这个任务还是落到了我自己的肩上。 于是乎，我鼓鼓勇气，尝试着去把这段从1977年到2017年的漫长而又渺小的四十年说的有趣些儿。 当我起笔去写这篇文章的时候，小伙伴们还在工作室因为某个服务器后台技术争论不了，这样看来生信人团队还是非常有希望的。另外，关于测序简史这一块，我一直不知道怎么去娓娓道来，不知道如何才能说得清楚，还不让大家反感，我只能硬着头皮利用自己知道的皮毛知识给大家编织一个我所认为的测序简史，博君一笑。 由于这篇文章内容过长，我觉得还是轻松点，大家才能阅读下去，毕竟很少有人能够逼着自己去做一些事情，一点一点的诱惑，不仅有用，而且高效，为啥不用呢，废话到此结束，言归正传。 啥叫测序？这个官方有官方的解释，大家可以自行百度，我觉得通俗意义上跟测序身高体重三围没啥区别，区别在于测序难度大并且包含的信息量大。 身高仪测量你的身高信息，体重称量你的体重信息，三围表征你的性感，不是健康信息。测序是测量你的遗传信息。 遗传信息，大家应该都清楚，如果不清楚的话麻烦各位翻一翻高中的肺炎双球菌实验，讲的就是啥是遗传信息，如何发现遗传信息的。 放张图，方便大家回忆。  原来的科学家们通过老鼠死没死，最终得到的结论是DNA是主要的遗传物质，部分物种的遗传物质是RNA。 在弄清楚这个事情之后，大家也都知道沃森和克里克还有一些被遗忘的科学家一起努力弄清楚了DNA是双螺旋结构。并且（A-T，G-C）。 第一代测序技术 一、简介 第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格（Sanger）和考尔森（Coulson）开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆（Maxam）和吉尔伯特（Gilbert）发明的化学法（链降解）. 并在1977年，桑格测定了第一个基因组序列，是噬菌体X174的，全长5375个碱基。自此，人类获得了窥探生命遗传差异本质的能力，并以此为开端步入基因组学时代。研究人员在Sanger法的多年实践之中不断对其进行改进，在2001年，完成的首个人类基因组图谱就是以改进了的Sanger法为其测序基础。 一代测序技术的原理见下图。再模板中首先分别加入A、T、G、C和四种ddNTP双脱氧核苷酸（加入ddNTP序列合成会终止），如下图第一个加入ddATP，这样每一个位置上的A位置会大量的被ddATP替代，然后终止，然后再分别加入其他的ddNTP，让他随机终止。这样对得到的这些序列进行跑胶。就得到了如下的胶图。根据ACGT的加入顺序和位置，获取信息。这个方法准确率高，费用高，是先合成，再测序的。  桑格先生13年与世长辞，但是一代测序技术在他发明之后经过各个单位的改进，今天还被大量使用。 Of the three main activities involved in scientific research, thinking, talking, and doing, I much prefer the last and am probably best at it. I am all right at the thinking, but not much good at the talking. —Frederick Sanger, 1988 二、一代测序主要应用方向 大伙肯定好奇啥是黄金测序，标题很抢眼，但的的确确存在测序的黄金标准：一代测序了，小编故称之为黄金测序。 今天给你们带来一些低门槛纯经验的黄金测序（哈哈就是一代测序了）中你应该知道的point：高通量测序最近这几年很火越来越火，但是世界上更多的还是一帮天天做分子克隆、养细胞、养细菌、杂蛋白的生物学家，究其原因Sanger测序还是测序届的金标准，由于精确度高于2、3代测序且保持大白菜价格使之地位稳固。应用范围:De Novo测序、重测序: 如突变检测、SNPs、插入、缺失克隆产物验证、比较基因组、分型: 如微生物和真菌鉴定、HLA分型、病毒分型 、其它: 如甲基化分析（重亚硫酸盐测序）和SAGE（基因表达串联分析）方法 、临床应用：肿瘤突变基因的检测和肿瘤个体化治疗。 三、一代测序注意问题 声明：1、凡本网注明“来源：小桔灯网”的所有作品，均为本网合法拥有版权或有权使用的作品，转载需联系授权。2、凡本网注明“来源：XXX（非小桔灯网）”的作品，均转载自其它媒体，转载目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。其版权归原作者所有，如有侵权请联系删除。 3、所有再转载者需自行获得原作者授权并注明来源。  相关分类图文热点 最新文章
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